視網(wǎng)膜血管網(wǎng)鋪片PAS染色
視網(wǎng)膜血管網(wǎng)鋪片是研究糖尿病視網(wǎng)膜病變 (diabetic retinopathy,DR)的金標(biāo)準(zhǔn)之一,可以定性、定量地評(píng)估視網(wǎng)膜血管形態(tài),包括血管走行、面積分布和管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu),更直觀地了解DR微血管的病變情況。
PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上
染色結(jié)果:
視網(wǎng)膜毛細(xì)血管呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。視網(wǎng)膜毛細(xì)血管呈紫紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。閉鎖毛細(xì)血管細(xì)胞核消失,且管腔萎縮變細(xì)呈細(xì)線狀。
單獨(dú)剝?nèi)⊙矍蛞暰W(wǎng)膜,用胰酶消化去除視網(wǎng)膜內(nèi)細(xì)胞只保留血管網(wǎng),將血管網(wǎng)均勻地鋪在載玻片上進(jìn)行PAS染色。PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色。一般用來(lái)顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合呈現(xiàn)紫紅色,復(fù)染蘇木素,細(xì)胞核呈藍(lán)色。毛細(xì)血管基底膜含有大量糖類物質(zhì),經(jīng)PAS染色后呈現(xiàn)紫紅色,進(jìn)而將血管網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)染出來(lái)。
樣本的保存運(yùn)輸條件及注意事項(xiàng):
1)整顆眼球4%PFA固定24h以上,常溫保存運(yùn)輸。
2)固定樣本一個(gè)月內(nèi)送樣檢測(cè),固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng),制片效果不佳。
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